1．将恒温槽调节至25±0.1 ℃恒温。

2．用上皿天平称8 g蔗糖，放到50 mL烧杯中，加水至40 mL处，用玻璃棒搅拌使之完全溶解（若溶液混浊需进行过滤），用移液管取25 mL蔗糖溶液和25 mL的2mol·dm-3的HCl溶液分别注入双叉管的两个叉管中（注意勿使两溶液混合），然后盖上胶塞将此双叉管置于恒温槽中恒温。
                 
图6-4 恒温旋光管

3．旋光仪的清零

先把旋光仪左侧的交直流转换开关按向交流（AC），再把旁边的电源开关打开，这时钠光灯在交流工作状态下起辉，经5分钟钠光灯激活后，钠光灯才发光稳定。再将交直流转换开关按向直流（DC），若开并转换后，钠光灯熄灭，则需要将开关上下重复再扳动1~2次，使钠光灯在直流下点亮，为正常。 “测量”键只能按一下，使仪器处于测量状态，这时数码管应有数字显示。

洗净旋光管的各部件，注入蒸馏水使液体在管口形成一凸面，先放玻璃片，再用螺旋帽旋紧，勿使漏水或有气泡形成（若有小气泡，将其赶到旋光管的扩大部分），注意不要过分用力，以不漏为准。用干布擦净旋光管两端玻璃片，然后放入旋光仪中，盖上盖子，待示数稳定后，按“清零”按钮。将旋光管的蒸馏水倒掉，擦干待用。

4．αt的测定

待双叉管恒温后（不能少于10分钟），摇动双叉管使两种溶液充分混合，迅速用少量混合液洗旋光管两次，然后用混合液注满旋光管，盖好盖子（检查是否漏液或形成气泡），擦净旋光管两端玻璃片，立即置于旋光仪中，测定其旋光度，同时记下时间。在测定第一个旋光度之后的第5、10、20、30、50、75、100分钟各测定一次。

5．α∞的测定

为了得到反应结束时的旋光度α∞，用从热水器中放出的热水在大烧杯中调至约60 ℃（注意勿使温度过高）的水浴，将步骤4中双叉管中剩余的混合液放到水浴中放置30分钟左右，使蔗糖水解完全。然后冷却至实验温度，再按测量操作，将此混合液装入旋光管，测其旋光度，此值即可认为是α∞。实验结束后，应立即将旋光管洗净、擦干，防止酸对旋光管的腐蚀和蔗糖对玻璃片、盖套的粘合，双叉管洗净后放入烘箱中烘干。按步骤3中的相关的相反顺序关闭旋光仪电源。