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同学们已经学完了本章的知识点一、知识点二、知识点三、知识点四和知识点五的有关知识。下面由老师把你学过的知识要点归纳一下。

本章重点阐述了色谱分离分析的原理及应用,以及气相色谱和高效液相色谱法的原理、仪器部件和应用。

色谱法是一种分离分析技术,它是基于混合物中各组分在互不相溶的两相中,具有不同的分配系数,当两相做相对运动时,混合物各组分在两相间进行反复多次的分配。这样就使得那些分配系数只有微小差别的组分,在移动速率上产生差别,从而得到分离。根据色谱流出曲线给出的各种信息,可对各组分进行分析和测定。

色谱法进行分离的理论依据是塔板理论和速率理论。塔板理论描述了组分在色谱柱中的分配行为,提出了用neff和Heff来评价色谱柱的分离效能。速率理论是在塔板理论的基础上,吧色谱分配过程与组分在两相中扩散和传质过程相联系,较完善的解释了影响塔板高度的各种因素。为了更全面、真实地反映相邻组分在色谱柱中的分离情况,提出了用分离度R作为色谱柱总分离效能指标。由于R既反映了两组分保留值的差异,即固定液对两组分的选择性,又考虑到色谱峰宽度对分离的影响,即柱效能neff的高低,由此导出色谱基本分离方程式。色谱基本分离方程式将分离度R与柱效能、柱选择性联系起来,为色谱分离条件的选择提供了理论依据。

色谱定性分析方法主要根据保留值与已知物对照定性,利用保留值经验规律定性和根据文献保留数据定性。色谱定量分析方法主要采用归一化法、内标法和标准曲线法。

常用到的色谱法有气相色谱法和高效液相色谱法。

气相色谱法是以气体为流动相的色谱技术,根据固定相的状态不同可分为气-固色谱和气-液色谱。气相色谱仪主要由气路系统、进样系统、分离系统、温度控制系统和检测记录系统所组成。气相色谱分析中,混合物中的各组分能否分离,主要取决于色谱柱中的固定相。气相色谱中所使用的固定相可以分为三类固体固定相、液体固定相和合成固定相。气相色谱检测器根据检测原理的不同可分为浓度型和质量型检'测器,也可分为通用性检测器和选择性检测器。一个性能优良的检测器应该是灵敏度高、检出限低、死体积小、响应迅速、线性范围宽和稳定性好。目前气相色谱中常用的检测器有热导检测器、火焰离子化检测器、电子捕获检测器和火焰光度检测器等。气相色谱分析中,可以根据基本色谱分离方程式及van Deemeter方程,对色谱分离的操作条件进行优化。

高效液相色谱法是一种以液体为流动相的色谱技术,利用物质在固定相和流动相两相中吸附或分配系数的微小差异达到分离的目的。高效液相色谱法采用细微粒固定相、高压输液泵和高灵敏度检测器,具有高效、高速、高灵敏度的特点,适合于那些沸点高、热稳定性差、相对分子质量大的物质的分离分析。高效液相色谱仪器主要由高压输液系统、进样系统、分离系统及检测系统所组成。色谱柱是高效液相色谱的核心部件。目前,液相色谱常用的检测器有紫外吸收检测器、荧光检测器、示差折光检测器、蒸发光散射检测器、电化学检测器和质谱检测器等。其中,示差折光检测器和蒸发光散射检测器属于通用型检测器,其余的属于选择型检测器。根据固定相和分离机理的不同,高效液相色谱可分为如下几种类型液-固吸附色谱、液-液分配色谱、化学键合相色谱、离子交换色谱、离子色谱和尺寸排阻色谱等。其中,化学键合相色谱是当今最重要、应用最广泛的色谱方法。由于色谱分离方法各有自身特点和应用范围,所以在完成某项分离任务时,应按照分析目的、试样性质和数量及现有仪器设备条件来选择最合适的方法。一般可根据试样相对分子质量范围、溶解度及分子结构等进行分离方法的初步选择。  

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