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知识点五:高效液相色谱法



高效液相色谱法(HPLC)是20世纪70年代初发展起来的一种新型分离分析技术。在常压下操作的液相色谱,分离一个样品往往长达几小时至几十小时,因此工作效率很低。人们曾对这种经典液相色谱法试用了柱前加压或柱后减压的办法来提高流速,以缩短分离时间,但是结果失败了。根据液相色谱理论,因为随着流动相流速的提高,板高则增大,所以柱效会显着降低。随着生产技术的提高,人们制成了细小(<10μm)而高效的填充物,从而使柱效大大提高。但是随着填充物粒度的减小,柱压降显着增大,为了得到合理的流动相流速,使用了高压;输液泵,使流速达到1~10 mL/min。从而使分析一个多组分样品只需几分钟到几十分钟时间。随着高效固定相、高压泵和高灵敏度检测器以及电子技术和计算机技术的应用,70年代以来逐步实现了液相色谱分析的高效、高速、高灵敏和自动化操作。因此人们常称它为高效液相色谱或现代液相色谱,以区别于经典液相色谱。我们通过上述视频分析深入了解了高效液相色谱法,现在我们来进行归纳总结:

一、 高效液相色谱法的特点

与气相色谱相比高效液相色谱具有如下特点:

(一)分析范围广

(二)可选择的流动相多

(三)操作温度低

二、高效液相色谱仪

(一)高压输液系统

(二)进样系统

(三)分离系统

(四)检测记录系统

1.紫外光度检测器(UV)

2.示差折光检测器(RI)

3.荧光检测器

4.电化学检测器

三、高效液相色谱的类型

(一)液-固吸附色谱

(二)液-液分配色谱

(三)化学键合相色谱

(四)离子交换色谱

(五)离子色谱

(六)凝胶色谱

边学边练

通过对高效液相色谱法的学习

你是否了解了高效液相色谱法呢

接下来我们进入总结与反思